Имунохистохимично проучване при рак на гърдата

IHC анализът при рак на гърдата означава имунохистохимично изследване на биопсии на засегнатата област на гърдата. Този изследователски метод представя сложни взаимодействия на ракови антигени с антитела. Необходимостта от извършване на изследването се обяснява с високото информационно съдържание и възможността за избор на правилния метод на терапия. Лекарите казват как се извършва анализът и какви данни могат да бъдат намерени.

Какво е?

Имунохистохимичният анализ се извършва с помощта на специфични маркери за определяне на ракови огнища, тяхната агресивност, активност и клетъчен тип. Това е лабораторен микроскопски метод на изследване, който изисква използването на антитела срещу ракови антигени, чиято концентрация се увеличава в случай на активен злокачествен процес.

Следните фактори са идентифицирани, разкрити чрез IHC анализ:

• Her-2-neu - в нормалните клетки този протеин контролира процеса на делене, следователно при карцином концентрацията му се увеличава значително.
• Ki 67 при рак на гърдата е основното вещество, което отразява процесите на пролиферация в клетките. Туморната тъкан се развива неконтролируемо, което може да се види от концентрацията на CI 67.
• VEGF е фактор, отговорен за развитието на кръвоносната мрежа. Злокачествената трансформация се характеризира с образуването на нови капиляри, което се отразява в изменението на този показател.
• Определянето на чувствителността на клетките към женските полови хормони - е важно при лечението на карцином на гърдата.

Списанието „Modern Oncology“ 2017 публикува информация за пълното излекуване на рак на гърдата с антиестрогенни лекарства в присъствието на специфични рецептори за хормони на повърхността на атипичните тъкани.

Кога да се направи?

Имунохистохимичният анализ е показан в следните случаи:

• съмнение за рак на гърдата;
• определяне на стадия на злокачествения процес;
• идентифициране на локализацията на карцинома;
• определяне степента на разпространение на туморни огнища;
• определяне на вида на патологичното образование;
• установяване на дълбочината на атипията и нивото на диференциация;
• избор на метод на лечение;
• наблюдение на ефективността на противораковата терапия.

Обучение

Имунохистохимичното изследване няма специални ограничения преди провеждането. Необходимият материал за анализ е парче патологична тъкан. Той се взема по време на тънкоиглена биопсия от предполагаемото място на тумора. Ако това е невъзможно, оградата се извършва директно при извършване на операция за резекция на млечната жлеза или карцином в границите на здрави тъкани. Поставете тъканта в стерилен съд.

Извършване

Имунохистохимията се извършва в строги стъпки, за да се сведе до минимум вероятността от грешни резултати. Основното нещо, което трябва да направи лабораторен лекар, е да изолира тъканта там, където има ракови компоненти. Анализът се състои от следните стъпки:

При провеждане на изследване е необходимо да се отдели част от тъканта с ракови клетки, които ще бъдат анализирани..

1. Когато материалът попадне в лабораторията, той се поставя във формалинов разтвор за обезмасляване.
2. След това те се обработват с течен парафин, което дава възможност да се оценят промените във всяка област и да се изберат тези, към които ще бъдат приложени конкретни маркери.
3. Пробата се разделя на еднакви секции в зависимост от броя на използваните реагенти.
4. Резени с дебелина 1 мм и фиксирани върху стъкло.
5. Оцветяване на материала.
6. Необходимите реактиви се добавят към всяка площадка.

Продължителността на имунохистохимичното проучване е 10-14 дни. Колкото повече фактори са необходими, толкова по-дълго отнема анализът. Ki67 за рак на гърдата е много чувствителен, поради което изисква внимателен и задълбочен подход. Определянето на този показател е най-важно за по-нататъшното лечение и прогноза, поради което се препоръчва да се направи няколко пъти по време на използването на противоракова терапия..

резултати

Каква е нормата?

Фактор Her-2-neu се определя като "отрицателен" при имунохистохимично изследване на здрав пациент. Това означава, че няма патологично неконтролирано разделяне в тъканта на гърдата. Такъв резултат има благоприятна прогноза, тъй като ако се определи за първи път, няма рак процес. Определението за "отрицателен" Her-2 в хода на лечението означава прекратяване на размножаването на туморни тъкани и спиране на прогресията на карцинома.

Показателите Ki 67 в нормални условия са равни на нула, в случай на отклонение от нормата, трябва да се предпише допълнителен преглед.

Декодирането на нормата Ki 67 включва пълното й отсъствие. Появата му в млечната жлеза, дори в незначителна концентрация, изисква допълнително изследване за потвърждаване или опровержение на диагнозата рак. VEGF обикновено е до 200 nmol / L. Тестът за чувствителност към естроген се извършва, ако ракът на гърдата е потвърден.

Докторът-онколог Н. А. Савелов в доклада си описва основните диагностични проблеми при IHC рак на гърдата и предлага методи за тяхното отстраняване (https://www.youtube.com/watch?time_continue=1188&v=zrxNYaQquMI)

Отклонение от нормата

Индексът на изменение на фактор Ki 67 се определя, както следва:

"Положителният" Her-2-neu имунохистохимичен тест се определя като "+". 3 плюс означава потвърждение за наличието на тумор в млечната жлеза, 2 - изисква използването на допълнителни диагностични методи за поставяне на диагноза. Индексът VEGF от 220 до 1060 nmol / l показва активно кръвоснабдяване на тумора, силно развита капилярна мрежа. Ако ракът няма естрогенни рецептори, това показва значителна атипична тъкан и изисква използването на агресивни терапии.

Имунохистохимична диагностика на рецепторния статус на рак на гърдата (PR, ER, ki67, Her2 neu)

Стандартизирано имунохистохимично проучване: рецепторен статус при рак на гърдата (PR, ER, ki67, Her2 neu). Извършва се само ако има завършен микропрепарат върху предметно стъкло и тъканна проба в парафинов блок.

IHC проучване (ER, RP, Her2 / neu, Ki-67), имунохистохимичен анализ на рецепторния статус на рака на гърдата.

IHC (ImmunoHistoChemistry) тест за състояние на рецептора на рак на гърдата (ER, PR, HER2, Ki67), свръхекспресия на HER2 от IHC, естрогенни рецептори, рецептори на прогестерон, ER и PR статус, статус на рецептора на естроген и прогестерон.

Какъв биоматериал може да се използва за изследвания?

Парафинов блок с биопсия на образуването на гърдата. Тъкани от първичния тумор могат да бъдат получени с помощта на биопсия с дебела игла, както и хирургическа операция на разреза и ексцизия. Тъкан от гръдната стена, регионалните лимфни възли или отдалечени органи могат да бъдат взети за биопсия за откриване на метастази.

Обща информация за изследването

Съвременните принципи и стратегии за лечение на рак на гърдата се основават, inter alia, на резултатите от оценката на рецепторния статус и пролиферативния потенциал на туморните клетки. Туморните клетки имат способността да произвеждат и поставят на повърхността си специални протеини - рецептори, чието стимулиране води до началото на клетъчното делене и растежа на тумора. Тези рецептори са в състояние да се свържат с вещества, които обикновено присъстват в организма и първоначално не са свързани с развитието на злокачествено новообразувание. Според настоящите клинични насоки, наличието на следните рецептори върху туморните клетки е важно за рака на гърдата, различни комбинации от които се наричат ​​рецепторен статус:

Рецептори за хормони - естроген и прогестерон (ER, PR). Значителна част от туморите на гърдата са хормонално зависими, т.е. техният растеж се подпомага и стимулира от естроген и прогестерон. Туморите с положителен хормонален рецепторен статус реагират добре на терапия с хормонални аналози (тамоксифен), които блокират съответните рецептори - свързват се с тях, но не предизвикват активиране на вътреклетъчни процеси и не позволяват на рецептора впоследствие да се свърже с хормона. По този начин, изследването на производството на ER и PR от тумор дава възможност да се определи неговата чувствителност към тези лекарства..

Рецептор от втория тип за рецептор 2 на човешки епидермален растежен фактор (HER2 / neu). В клетките на някои тумори на гърдата има повишено производство на този рецепторен протеин, който, когато се комбинира с естествен растежен фактор, започва процеса на делене в туморната клетка. Общият брой пациенти с HER2-позитивен рак на гърдата варира от 15% до 20%. Определянето на HER2 / neu има не само прогностична стойност (такива тумори обикновено прогресират по-бързо и имат по-агресивно клинично развитие), но също така дава възможност да се оцени възможността за използване на целеви лекарства - моноклонални антитела към HER2 рецептора - трастузумаб (Herceptin), лапатиниб, пертузумаб. В допълнение, HER2-положителните тумори са устойчиви на тамоксифен.

Пролиферативната активност е показател за способността на туморните клетки към неограничено делене, което е основният фактор за биологичната агресивност на тумора. Процесът на разделяне е придружен от появата на определени протеини в клетката, един от които е Ki-67. Той не се произвежда в клетки в покой, което му позволява да се използва като маркер на пролиферативна активност на тумора. Определянето на нивото на Ki-67 е от голяма прогностична стойност, тъй като туморите от най-слабо зрелите и диференцирани клетки имат най-висока пролиферативна активност.

Всички горепосочени маркери могат да бъдат открити чрез имунохистохимично изследване на биопсичен образец или хирургичен материал на тумора. За анализ се изрязват тънки срезове от готовия парафинов блок с помощта на специален микронож, които след това се прикрепват към стъклени стъкла и се оцветяват с рутинни багрила, така че да е възможно да се разграничат клетките една от друга и от междуклетъчното вещество. След това участъците на предметните стъкла се оцветяват с разтвори на антитела, маркирани с флуоресцентни етикети, специфични за един от изследваните рецептори. Ако желаният рецептор присъства в туморната клетка, антитела се свързват с нея и при разглеждане на стъклото под специален микроскоп можете да видите флуоресценция, което ще покаже положителен резултат от теста. Освен това, когато разглежда секцията, морфологът ще може да види, че оцветеният маркер се намира в ядрото, клетъчното вещество или върху мембраната на туморните клетки. Броят на приложените разтвори с антитела съответства на броя на маркерите, които се изследват в пробата. Степента на флуоресценция и процентът на клетките, в които тя присъства, са в основата на интерпретацията на резултатите от имунохистохимичния анализ и са описани по-подробно в съответния раздел..

За какво се използва изследването?

• Да се ​​определи статуса на хормоналния рецептор и степента на пролиферативна активност на рака на гърдата, за да се оцени прогнозата и индивидуализацията на лечението, включително определянето на индикациите за назначаване на таргетна терапия.
• Въз основа на резултатите от откриването на хормонални рецептори се определя целесъобразността на използването на антиестрогени и HER2 рецепторът се определя от целеви анти-HER2 лекарства. Откритото отсъствие на тези маркери дава възможност да се избегне назначаването на съзнателно неефективна терапия. Високият индекс на пролиферативна активност, както и негативността в рецепторния статус, в по-голямата си част е индикация за добавяне на цитостатични лекарства към лечението..

Когато е планирано проучването?

• При наличие на хистологично верифициран рак на гърдата - новодиагностицирани, рецидивиращи и метастатични тумори.

Какво означават резултатите?

Когато се тълкуват резултатите от имунохистохимичното определяне на рецепторния статус на стероидните хормони (естрогени и прогестерон) при тумори на гърдата, трябва да се оцени не само процентът на клетките, оцветени с антитела, но и интензивността на оцветяването. И двата параметъра се вземат предвид в скалата на Allred, където процентът на положителните клетки се оценява от 0 до 5 точки, а интензивността на оцветяването е от 0 до 3. Сумата от двата показателя е крайният резултат, който определя положителността на тумора от рецепторния статус: 0-2 отрицателни, 3- 8 положителни. Общият резултат от 3 по тази скала съответства на 1-10% от оцветените клетки и е минималният положителен резултат, когато хормоналната терапия може да бъде ефективна..

Понякога рецепторният статус се определя единствено от процента на клетките с оцветени ядра. В такива случаи NCCN препоръчва всички тумори с повече от 1% положителни клетки да се считат за положителни..

При интерпретиране на оцветяването за рецептора HER2 / neu се взема предвид само оцветяването с мембрана (оцветяване на клетъчната стена), което се оценява по скала от 0 до +3:

резултат от 0 и +1 се счита за HER2 отрицателен;

+2 - граничен резултат, с него, според имунохистохимичното проучване, е невъзможно да се прецени наличието на HER2-neu рецептора на клетъчната повърхност, необходимо е да се извърши проучване FISH или CISH;

+3 - положителен резултат - целевата терапия с анти-HER2 лекарства ще бъде ефективна.

Според класификацията на Св. Gallen Consensus (2009), ниво на Ki-67 под 15% се счита за нисък индекс на пролиферативна активност, средно ниво от 16-30% и високо ниво над 30%.

Какво може да повлияе на резултата?

• Качеството на предоставените парафинови блокове, опитът и квалификацията на патолога, тъй като имунохистохимичният метод не е напълно стандартизиран и оценката на неговите резултати е до известна степен субективна.
• Тълкуването на резултатите от изследването трябва да се извършва изключително от лекар от съответната специалност, данните за ефективността и целесъобразността на предписването на определени лекарства, в зависимост от резултатите от изследването, са изключително препоръчителни по характер и могат да бъдат преразгледани, като се вземат предвид индивидуалните характеристики на пациента.

• Ако статутът на HER2 / neu-рецептор е неопределен (резултатът от имунохистохимично проучване 2+), се препоръчва да се извърши FISH- или CISH-проучване, което ще разкрие хиперактивацията на гена, кодиращ този рецептор. Ако тези проучвания са недостъпни, се допуска повторно имунохистохимично изследване, но върху различна проба от туморна тъкан.
• Има няколко скали за оценка на рецепторния статус на рака на гърдата, лабораторният доклад трябва да посочи кой туморен позитив е оценен в това проучване, както и описателна характеристика на броя на положителните клетки, оцветяващи характеристики на клетъчните структури и морфологични характеристики на клетките.

Хистологично изследване на биопсичен материал на образуването на млечната жлеза

Цитологично изследване на пунктата на гърдите

Определяне на туморния статус на HER2 чрез FISH

Определяне на туморния статус на HER2 по CISH метод

Който поръчва проучването?

Онколог, мамолог, гинекологичен онколог.

Литература

Дана Кармен Заха. Значение на имунохистохимията при рак на гърдата. World Journal of Clinical Oncology, 2014; 5 (3): 382-392.

Насоки за клинична практика на NCCN в онкологията: рак на гърдата. Версия 3.2017 - 10 ноември 2017 г. Достъпно на www.nccn.org.

Клинична лабораторна диагностика: национални насоки: в 2 тома - Т. I / Изд. В. В. Долгов, В. В. Меншикова. - М.: GEOTAR-Media, 2012. S. 658-660.

В. Ф. Семиглазов, Р. М. Палтуев, В. В. Семиглазов, Г. А. Дашян, Т. Ю. Семиглазова, П. В. Криворотко, К. С. Николаев. Общи насоки за лечение на ранен рак на гърдата St. Galle-2015, адаптиран от експерти от Руското дружество по онкология на бозайниците. Тумори на женската репродуктивна система, 2015; 3: 43-60.

IHC при рак на гърдата: изследователски характеристики

Имунохистохимичното изследване при рак на гърдата е анализ, който ви позволява да определите чувствителността на злокачествено новообразувание към определени вещества. С негова помощ те диагностицират стадия на патологията и установяват дали лечението е предписано правилно.

1. Какво е IHC?
2. Защо IHC?
3. Как се прави анализът?
4. Декодиране на резултатите
5. Прогностични фактори
6. Прогнозни фактори

Какво е IHC?

Ако говорим за това какво е IHC онкологията, това е изследване, което ви позволява да идентифицирате взаимодействието между протеини и антигени. Факт е, че засегнатите от онкологията клетки синтезират протеин. Той има връзка с антитела. Вземайки това предвид, експертите използват анализ, за ​​да определят формата и структурата на тумора..

Защо IHC?

IHC за рак на гърдата се извършва с цел:

• определяне на вида на заболяването за назначаване на терапия;
• разкриване на наличието на метастази, идващи от тумора, и техните граници;
• откриване на източника на метастази;
• диагностициране на стадия на патологията, когато е открита;
• оценка на ефективността на терапията;
• установяване на скоростта на развитие на метастази, ако има такива;
• идентифициране на чувствителността на кръвните клетки към определени лекарства и методи на лечение, за да се оставят ефективни средства и да се изключат онези лекарства и методи на терапия, които не засягат тумора.

Как се прави анализът?

Имунохистохимията на рака на гърдата се извършва чрез вземане на проби от тъкани, засегнати от онкологията. Биоматериалът се получава с помощта на биопсия или по време на операция. След това анализът се извършва на следните етапи:

• биоматериалът се поставя във формалин, след което се изпраща в лабораторията за по-нататъшни манипулации;
• специалистите обезмасляват тъканта;
• към материала се добавя специален течен парафин, който помага да се разкрие структурата на туморните клетки;
• извършва се микротравма - процедурата за отрязване на тънък слой парафин, дебел 1 мм;
• взетите проби се поставят върху специални очила;
• материалът е оцветен с реактиви;
• пробите се оставят за 12 дни, след което се оценява резултатът.

За анализа се използват няколко вида маркери. Ако по време на проучването в биоматериала се установи повишена концентрация на естрогени и прогестерони, се прави заключение за развитието на тумор. Това също показва появата на метастази от новообразувание. Ако анализът показва средни резултати, те говорят за слаб туморен растеж. Това предполага, че пациентът след подходяща терапия има всички шансове за възстановяване..

Чисто HER2 рецепторите влияят върху цветовата гама на реакторите с клетки, които са засегнати от рак. Колкото повече са, толкова по-ярък е тонът. В този случай хистологията се проявява като неточна наука, тъй като възприемането на нюансите на пробите е субективно и зависи само от чувствата на специалиста, извършващ анализа..

Декодиране на резултатите

При декодирането на резултатите се вземат предвид рецепторите за прогестерон - PR и естроген - ER. IHC в онкологията също така показва съдържанието на рецептора на човешкия епидермален растежен фактор (HER2 протеин) в биоматериала, взет като проба за изследването. Жените с карцином на гърдата имат повишен HER2.

Дешифриране на резултатите за естроген и прогестерон - ако в тумора се открият рецептори за мъжки и женски хормони, тогава растежът на образованието става под тяхно влияние, ако PR и ER в организма присъстват в нормата или концентрацията им се повишава. С навременното квалифицирано лечение пациентът може да разчита на благоприятен изход.

Тълкуването на резултатите от IHC се извършва в зависимост от нюанса на пробите в специална скала:

• 0-1 +. Този резултат показва, че концентрацията на протеин не е превишена. Не се изисква терапия с патология.
• 2+. Стойността показва средната концентрация на протеин. Това показва наличието на отрицателен тумор (карцином) на гърдата. В този случай се препоръчва да се извърши друг анализ, тъй като първото проучване не винаги дава точен резултат. Тестът FISH се извършва за изясняване на диагнозата. Това проучване определя концентрацията на протеин във всяка клетка. При нормално съдържание на HER2 анализът ще покаже положителен резултат, а при повишено съдържание - отрицателен.
• 3+. Протеинът надвишава нормалната стойност. Положителен тумор на гърдата се диагностицира.

Ако анализът показа положителен тумор, тогава патологията има агресивен характер на развитие. Той расте няколко пъти по-бързо, отколкото с отрицателна стойност.

След проучване на изследването, резултатът се декодира въз основа на индикатора на маркера Ki67. Ако стойността му е в рамките на нормалното, тоест 15-17%. Когато нивото му се повиши до 35%, туморът започва да расте бързо. Химиотерапията помага за забавяне на процеса. Ако анализът показа 85%, лекарите отказват да лекуват пациента, тъй като в този случай е невъзможно да се намали маркера и не може да се избегне фатален изход.

Има 4 вида рак:

• луминални А - рецептори за ER положителни, отрицателни за протеин, Ki67 по-малко от 14%;
• луминални В - рецептори за ER, за HER2 - отрицателни, Ki67 над 15%;
• Свръхекспресия на Erb B2 - PR и ER - отрицателни, протеини - положителни;
• Базал-подобен - отрицателна стойност за прогестерон и други фактори.

Прогностични фактори

Такива фактори демонстрират възможното поведение на тумора по време на анализа. Лечението няма ефект върху проучването. Благодарение на IHC, лекарят вижда как се държи туморът. Специалистът използва прогнозата, за да определи подходящата терапия за всеки пациент..

Прогнозни фактори

Изследванията на IHC за рак на гърдата могат да определят ефективността на лечението. Ако тестът покаже положителен рак, тогава се предписва химиотерапия. С отрицателна стойност - прием на лекарства.

IHC е проучване, което ви позволява да определите вида рак на гърдата и да предпишете адекватно лечение, което може да спаси живота на пациента, а в някои случаи и да се отърве от патологията.

Цели, подготовка, провеждане и декодиране на IHC при рак на гърдата

Ракът на гърдата е водещата причина за смърт сред жените, които имат злокачествени тумори. Благодарение на най-новите тенденции в диагностиката е възможно да се идентифицират атипични клетки в ранните етапи на еволюцията. IHC е специален метод за рак на гърдата. Анализът се състои в изследване на имунохистохимични реакции. Напълно нова и ефективна техника ви позволява да определите вида тъкан, сенсибилизация на клетките към лъчева терапия, а също така идентифицира причината за появата на метастази с помощта на хистология. Без IHC продуктивното лечение на заболяването е невъзможно.

На тяхната повърхност раковите клетки имат антигенни молекули, които са протеини или други макромолекули. Произвеждайки антигени, атипичните клетки предизвикват имунен отговор - производството на антитела. Връзката между раковите протеини и антителата се открива с помощта на имунохистохимия. Тази чувствителност позволява имунотерапия на рак.

Цели на IHC диагностиката

За да се изберат ефективни методи за лечение, процедурата за определяне на раковите елементи е необходима както за лекаря, така и за пациента. Изследванията на IHC се извършват по много критерии.

1. Тежестта на експресията се определя от прогестероновите и естрогенните рецептори.
2. Определяне на прогноза.
3. Определяне на атипична клетъчна модификация.
4. Установяване на структурни и функционални взаимоотношения в раковите клетки.
5. Извършване на хистогенетична класификация и тъканни проби.
6. Разпознаване и усилване на HER2 рецепторите при рак на гърдата.
7. Намиране на първичния тумор чрез метастази.
8. Имунитет и отзивчивост към приложението на химиотерапевтични лекарства.
9. Чувствителност към метода на лъчева терапия.
10. Скорост на растеж на местата на стазисните тъкани.

Определянето на процента на маркера HER2 ви позволява да установите колко бързо туморът метастазира. Често такъв израз на антиген има отрицателна прогноза и кратко съществуване и заболяването се наблюдава по-често при жените в репродуктивния период..

Броят на рецепторите на стероидни хормони в големи количества дава шанс за възстановяване, ако е било възможно да се определи диагнозата в ранните етапи. Резултатите от показателите за имунохистология трябва да бъдат дешифрирани от онколог.
Имунохистологичният метод е показан за жени на всяка възраст със съмнителни резултати за изключване на рак. Положителната обратна връзка при лечението в ранните етапи определя по-бързото възстановяване и дори пълното излекуване..

Също така, изследването на IHC е препоръчително да се проведе при заболявания на женските репродуктивни органи, наличие на безплодие. Събирането на ендометрични клетки ви позволява да запишете факта на невъзможността за зачеване. IHC определя как рецепторите в матката реагират на хормоналните компоненти, което допринася за избора на методи за лечение.

Провеждане и тълкуване на анализа

За процедурата IHC се извършва тъканна биопсия. Също така е възможно да се получи туморна тъкан чрез операция. Поставянето на проби във формалинова течност ще обезмасли тъканта. След такава подготовка на материала, най-тънкият участък от клетки се поставя в парафин, след което се поставя върху очила чрез микрототиране. След това, чрез оцветяване с помощта на реактивни компоненти, съдържащи антитела, се диференцират формата и нозологичните параметри на тумора. В рамките на 10 дни, максимум две седмици, лаборантите дешифрират показателите.

Имунохистохимията е сложен последователен процес на няколко етапа.

Видът рак се тълкува от количеството атипични антитела. Концентрацията на естроген и прогестерон в биоматериала показва еволюцията на туморния процес, както и появата на метастази.

При средни критерии трябва да се знае бавният растеж на тумора, което потвърждава положителното предвиждане на процеса.

Броят на HER2 гените оказва пълно влияние върху цвета на реактивните лекарства с наличието на ракови клетки. Колкото по-голям е броят им, толкова по-интензивно е тонизирането. Дешифрирането на хистологичните цветови нюанси е по-субективно, тъй като се оценява от различни специалисти по различни начини поради възприемането на цветовата гама.

Тълкуването на резултатите от IHC се регулира от следния микрограм:

• 0-1 + съдържанието на протеиновия елемент е незначително. Не се изисква лечение.
• 2 + средният процент показва негативността на атипичните клетки в гърдата с раков процес. За по-ефективен резултат техниката трябва да се повтори. Или опитайте FISH.
• 3 + излишъкът от нормата показва наличието на положителен злокачествен процес.

С последния критерий еволюцията на тумора е агресивна, което означава по-бърз растеж на тумора, отколкото при отрицателни стойности.

• Luminal A
• Luminal B
• Прекалено изразяване
• Базал-подобен

Също много важни са коефициентите Ki67, които определят стадия на рака на жлезата. Следователно ще бъде разумно да се изследва хормоналният фон, за да се установи поведението на тумороподобния процес. При увеличен брой са необходими химическа терапия и операция за унищожаване на тумора.

Необходимостта от хистологично изследване

IHC не винаги дава информативни резултати в случай на съмнение или наличие на онкология, поради което се извършва хистология на рак на гърдата. Състои се в микроскопия на биопсичен материал, който показва не само наличието на атипични клетки, но и първопричината за произхода на рака. Процедурата е достатъчно болезнена, но това не променя нейното значение.

Този метод провежда диференциална диагностика с доброкачествени образувания, карцином, фиброаденом и други хиперплазии на гърдата.

Въз основа на резултатите от откриването на ракови клетки, хистологията установява морфологията на тумора и неговите видове. Разграничават се следните хистологични видове рак на гърдата:

• Лобуларен или лобуларен рак
• Ductal
• Папиларен
• Медуларен
• Възпалително
• Колоиден
• Метапластичен рак

Също така, има инвазивен тип - с растеж в тъканта, неинвазивен - с растеж в канала. По-подробни снимки от всеки тип могат да се видят на страниците на интернет ресурса.

Значение на имунохистохимията

Изследването на рака определя ефективността на лечението. Използването на голям брой маркери за идентифициране на структурата на атипия, форма, степен и други показатели за образуване на рак ви позволява правилно да предписвате терапия:

• Отрицателните стойности са ограничени до лекарства.
• Позитивните се нуждаят от химиотерапия.

Назначаването на IHC дава възможност за диагностициране на етапа, което гарантира коректността и навременността на предписаното лечение.

За най-надеждни и правилни критерии, жените със съмнение за рак трябва да се подложат на мамография, вземане на проби от биопсични тъкани и други видове спомагателни тестове..

IHC за рак на гърдата

IHC при рак на гърдата е необходимост на съвременната онкология. Неговите резултати ви позволяват да изберете най-подходящото противораково лечение за жена..

Какво е имунохистохимия при рак на гърдата?

Имунохистохимичният анализ или накратко IHC се основава на способността на имунната система да синтезира вещества, които неутрализират чужди агенти - бактерии, вируси, гъбички и токсини, секретирани от тях. Чуждите агенти са антигени, в тяхно присъствие имунните клетки произвеждат специфично антитяло, всяко антитяло има свой антиген.

Ракът на гърдата умело се крие от санкциите на имунитета, въпреки това раковите клетки и техните структурни елементи са антитела, имунитетът не ги вижда, но IHC открива тези антитела.

С IHC парче тумор се третира с реагенти с антигени, които намират своето антитяло и се комбинират с него, променяйки цвета на изследваното парче злокачествена тъкан.

Защо се извършва имунохистохимия при рак на гърдата??

Имунохистохимията е необходима не за научна работа, а за практическа употреба:

1. Откриването в клетки на рецептор за полови хормони, чувствителен към естроген (ER) или прогестерон (PR), предсказва малко по-плавен ход на рака с по-малка вероятност от метастази, с преобладаваща локализация на метастази в костите, по-дълъг живот дори при генерализиране на процеса;
2. Различните концентрации на ER и PR ви позволяват да изберете оптималното лечение за конкретна жена, така че с високо ниво на ER в комбинация с PR и дори без тях, можете да разчитате на добър резултат от хормонална терапия, без рецептори химиотерапията е задължителна;
3. Наличието на HER2 в клетка с висока концентрация показва агресивността на рака, която изисква химиотерапия и специфичен HER2 неутрализатор;
4. Комбинацията от положителен хормонален статус с HER2 поражда съмнения относно ефективността на хормоналната терапия, следователно химиотерапията е включена в програмата за лечение;
5. Високата концентрация на Ki-67 е доказателство за висока степен на злокачествено заболяване и отново не позволява да се избегне химиотерапия.

Показания за имунохистохимия при рак на гърдата

При рак на гърдата има само една индикация за IHC - определянето на степента на агресивност на рака по неговите структурни компоненти, за да се избере оптималната програма за лечение.

Обичайният морфологичен анализ - хистологията показва степента на злокачественост на тумора и неговия клетъчен състав, често хетерогенен, но не позволява определяне на протеиновите структури:

• Чувствителността на всяка клетка към лекарства се определя от наличието на рецептори на полови хормони;
• Активността на клетъчната репродукция и скоростта на растеж на раковия възел се контролира от протеина HER2, ако има твърде много от него, ракът ще расте по-бързо и ще формира защитата на клетката срещу лекарства до пълна резистентност;
• Способността за бързо възпроизвеждане на заместването на мъртвите клетки, като същевременно улавя нови територии, определя маркера за разпространение Ki-67.

Концентрацията на всички тези клетъчни вещества определя IHC.

Подготовка за изследване

IHC за рак на гърдата се извършва извън тялото на пациентката, но с парче от нейния тумор. Днес всички жени с новооткрито новообразувание в жлезата на етапа на диагнозата със специална игла се подлагат на биопсия - ядрена биопсия.

Взета малка колона от ракова тъкан се подлага на хистологично изследване и IHC, което позволява проверка, тоест да се докаже наличието на рак и да се планира първично лечение. Туморът, отстранен по време на операция на млечната жлеза, също се подлага на хистологични и IHC изследвания за изясняване на плана за лечение.

Преди биопсията, жената трябва само да се успокои, не се изисква специфична подготовка от нея.

Провеждане на изследвания

Парче рак, взето по време на биопсия или от тъкан на гърдата, отстранено по време на операция в епруветка с формалин (за съхранение) се изпраща в патоморфологичната лаборатория. Парчето се нарязва на най-тънките плочи, които се запазват за много дълъг период - няколко десетилетия, така че при необходимост да има материал за анализ. Плочите също се подлагат на имунохистохимия..

IHC се извършва по два начина: антигените, въведени с реагента, са в пряк контакт с антитела или чрез посреднически антиген, който първо се търси сам с антитяло, а след това това дуо се намира от втория антиген, концентрацията на който се измерва.

Какво казват резултатите?

Откриването на ER и PR рецептори при рак на гърдата предсказва относително доброкачествен ход с ефективността на хормоналните лекарства, но в реалния живот туморът може да не реагира на ендокринна терапия, въпреки че процентът на резистентност е нисък.

Откриването на Ki-67 предсказва забързан живот и интензивно лечение, използвайки максимален химиотерапевтичен потенциал за промяна на отрицателната прогноза.

HER2 рецепторът е прогностичен фактор, който предполага да се съсредоточи върху химиотерапията, без много надежда за антихормонални ефекти, но от друга страна, предсказва необходимостта от използване на целево лекарство, което свързва анормален протеин.

Стенограма на изследването

Формално се смята, че 1% от ER вече е положителен, но до 10% от ER, надеждата за значителен резултат от ендокринната терапия е съмнителна. Имунохистохимичният анализ на рецепторния статус на рака на гърдата предполага следните отговори:

• от 0 до 2 точки - няма хормонална зависимост;
• с 3 - 8 точки - възможна е зависимостта от ендокринните ефекти, колкото повече точки, толкова по-високо е нивото на рецепторите, докато при 3 точки само една десета от раковите клетки имат рецептор.

Градация на отговорите при определяне на HER2:

• 0 и 1+ - нормално съдържание на протеин, подобно на здравите клетки на гърдата и не изисква никакви мерки;
• 2+ - съмнителен анализ, малко повече от нормата и е необходимо да се провери повторно по по-точен начин, в качеството на който те прибягват до FISH, което дава две възможности за отговор - „е“ или „не“;
• 3+ - необходим е явен излишък, целенасочена терапия за потискане на прекомерната активност.

Ki-67 протеиновите състояния:

• по-малко от 15% - ниска активност на разпространение;
• 16% - 30% - умерена агресивност;
• над 30% - висока агресивност.

Структурните елементи, определени от имунохистохимията, не гарантират изпълнението на предвидения - по време на лечението ракът променя характеристиките си. В нашата клиника реалните характеристики на злокачествения процес се определят в определен момент от времето и оптималното лечение се избира с помощта на панел от много гени..

Имунохистохимичен анализ на рак на гърдата: декодиране и индикации

Имунохистохимичното изследване е вид изследване на тъкани, използващо определени реактиви. След биопсия или операция взетият материал се оцветява за хистологичен метод на изследване..

В имунохистохимията на рака на гърдата използваните реагенти съдържат антитела, маркирани с определени вещества. Съединение антитяло-протеин, което образува специфична реакция, когато се комбинира с други места. В резултат на този метод може да се прецени наличието на различни вещества в тъканите..

Имунохистохимия на рак на гърдата: същността на метода

Всеки ден в човешкото тяло се появяват имунохистохимични реакции, чиято същност се основава на взаимодействието антиген-антитяло. Например, в случай на заболяване, когато вирусите и бактериите попаднат в човешкото тяло, в кръвта се образуват антитела, които улавят чужди вещества. Ваксинацията работи по този принцип, когато антитела се произвеждат в отговор на инжектираните антигени, които в случай на заболяване улавят чужди микроорганизми..

Възможно е да се открие рак, като се използват имунохистохимични изследвания, например при рак на гърдата. Методът се основава на въвеждането на серум с антитела, който се свързва с туморни фактори в организма.

Защо се използва имунохистохимично изследване?

Много учени по света са потвърдили наличието на редица специфични фактори в туморите, които са пряко свързани с прогнозата на рака и отговора на подходящо лечение..

Тези фактори включват:

• Рецептори за женски полови хормони;
• Маркери за активност на онкологичния процес;
• Чувствителност към антинеопластични средства;
• Съдов туморен растежен фактор.

При провеждане на рутинно хистологично изследване със съмнение за рак на гърдата е невъзможно да се открият такива характеристики, които туморът може да съдържа, поради което имунохистохимията на рака на гърдата има значително предимство пред другите методи за изследване.

Къде се извършва имунохистохимичният анализ на рака на гърдата и неговото декодиране?

Материалът за изследване е туморната тъкан, която се взема по време на биопсия или по време на операция. Трябва да се отбележи, че материалът трябва да се вземе преди започване на курса на терапия, в противен случай резултатът ще бъде ненадежден.

Взетият материал се поставя във формалин (дезинфектант) и се изпраща в лабораторията. Там се обезмаслява и след това се излива със специален парафин. След това пробата се нарязва фино на плочи до 1 μm, поставя се върху стъклени стъкла и се оцветява с реагенти с необходимата концентрация.

Интензивността на оцветяването на реагентите с туморни клетки зависи от съдържанието на рецепторите. Колкото повече са в материала, толкова по-интензивен ще бъде цветът. Хистолозите интерпретират резултатите от оцветяването по специална скала:

• 0-1 + означава липса на онкологичен процес;
• 2+ означава средна концентрация на HER2 протеин в пробата и отрицателна неоплазма;
• 3+ показва повишено съдържание на HER2 протеин и образуването на рак е положително.

Можете да получите резултати за една до две седмици.

В лабораторията на болница Юсупов опитни специалисти ще направят компетентно вземане на проби от материал и ще дадат висококачествено дешифриране на получените данни. Мощна изследователска база ще позволи възможно най-бързо да се провери диагнозата и да се започне лечение въз основа на имунохистохимията на тумора. Огромният опит на лекаря и медицинския персонал гарантира на пациента успеха и ефективността на лечението.

Имунохистохимични тестове

Имунохистохимично изследване

Имунохистохимичното изследване (IHC) е в основата на съвременната морфологична диагностика на туморни заболявания, което определя правилността на диагнозата, по-нататъшната прогноза и, в някои случаи, формирането на индикации за назначаването на таргетна терапия.

Основната цел на изследването IHC е да се определи диференциацията и хистогенезата (тъканната принадлежност) на тумора.

Имунохистохимичното изследване (IHC) е допълнителен диагностичен метод, използван в допълнение към основното хистологично оцветяване с хематоксилин и еозин, което дава възможност да се идентифицират и разграничат доброкачествени и злокачествени новообразувания. Често окончателната диагноза, в допълнение към специфична морфологична картина, изисква изясняване на имунофенотипа или биологичните свойства на тумора, които играят важна роля в прогнозата на заболяването и определянето на индикациите за предписване на целеви лекарства. Към днешна дата съвременната наука успява да докаже, че именно определянето на биологичните свойства на тумора и откриването на генетични детерминанти (генетичните свойства на тумора) е ключът към успешното лечение в онкологията..

Напоследък IHC анализът се използва широко в ежедневната диагностична практика на патолозите и престава да бъде метод на чисто научни изследвания..

Основната цел на изследването IHC е да се определи диференциацията и хистогенезата (тъканната принадлежност) на тумора.

Какво представлява хистогенезата и диференциацията на тумора?

1. Хистогенезата на тумора е неговият тъкан. Изясняването на този факт има важна диагностична стойност и ви позволява да изберете разумно лечение. Всъщност неговата чувствителност към химическа или лъчева терапия зависи от произхода на тумора..

2. Степента на диференциация показва колко се различава туморната клетка от нормалната по структура и функция.

В зависимост от степента на диференциация, клетките на туморния субстрат са:

• диференциран, когато структурата на тумора е възможно най-близка до структурата на предшественика тъкан;
• слабо диференцирана, сходството на която с оригиналната тъкан се изтрива;
• недиференцирани (анаплазия) - клетки, които са загубили някаква прилика с нормалните (оригинални).

За какво е?

1. Хистологична диагностика на тумори;
2. Определяне на нозологичния вариант на тумора;
3. Способността за определяне на първичния тумор чрез метастази;
4. Определяне на прогнозата на туморно заболяване;
5. Определяне на възможностите и индикациите за таргетна терапия и др..

Възможностите на имунохистохимичните изследвания в съвременната практическа онкология са както следва:

Кога и как се прави изследване на IHC?

Този тест се предписва, ако има съмнение за наличие на туморно заболяване. Материал за изследване се взема по време на операция или чрез биопсия с помощта на специални форцепс и игли. От тъканта се прави тънък микрорез, който след това се третира с разтвор на специфични антитела (имунохистохимични препарати), които реагират с туморни протеини (антигени). Реагиралите области излъчват блясък с различна интензивност, въз основа на който лекарят прави заключения.Например, наличието на експресия на маркери като CD15 и CD30 от туморни клетки позволява диагностициране на лимфома на Ходжкин; CD117 - стомашно-чревни стромални тумори; CD20 - В-клетъчни лимфоми; CD3 - Т-клетъчни лимфоми; HMB45, MelanА - меланом и др..

Антитела

За IHC анализ на първични тумори и техните метастази се използва широк спектър от маркери - антитела (маркер - индикатор за нормални биологични процеси, патогенни процеси или фармакологичен отговор на терапевтична интервенция, който може обективно да бъде измерен и оценен). Антителата са цитоспецифични, тъканно специфични, те могат да отразяват процесите на клетъчна пролиферация и антигени, свързани с тумора, и накрая, те сами могат да бъдат туморни маркери, като онкофетални антигени, ензими, протеинови продукти на клетъчните онкогени и др..

Нашата лаборатория разполага с изчерпателен набор от антитела, одобрени за употреба като диагностични тестове за туморни и нетуморни лезии на различни органи и системи..

Количеството на използваните антитела зависи от индивидуалния случай и предполагаемата диагноза. "Разширен панел от антитела" е набор от антигени за различни туморни структури. Има и "малък панел", показващ най-често срещаните тумори. Изборът на панел от антитела може да се направи по два начина: поетапно, постепенно увеличавайки техния спектър, или можете веднага да използвате широк панел от реактиви. От една страна, значителни икономии на реагенти и средства с по-високи разходи за труд и дълго време за изпълнение, от друга страна, голяма консумация на антитела, някои от които помагат да се установи окончателната диагноза във възможно най-кратък срок.

Специалистите от нашата лаборатория са привърженици на това, че IHC анализът, като допълнителен метод, трябва да включва както положителни резултати от експресия на маркери, характеризиращи определен имунофенотип на тумор, така и отрицателни, което прави възможно изключването на други хипотези и намаляването на обема на диагностичните грешки до минимум..

Избрани заболявания и антитела, използвани за тяхната диагностика

Тумори на гърдата

Ракът на гърдата е най-често срещаният рак при жените и втората най-честа причина за смърт, свързана с рак. Ранната диагностика, навременното и правилно лечение могат значително да увеличат шансовете за възстановяване. Традиционните техники на имунохистохимия (IHC) могат да работят с много малки тъканни проби. Това обстоятелство, в комбинация с използването на антитела, специфични за антигените на туморните клетки, прави този метод ефективно средство в ръцете на патоморфолог, който диагностицира и прогнозира хода на онкологичните заболявания..

Основни диагностични маркери:

• Естроген рецептор
• Прогестеронов рецептор
• HER-2 / neu
• Ки-67
• p120 Катенин
• CadherinE
• „Златният стандарт“ за диагностициране на тумори на гърдата - хормонален профил PR, ER, HER-2 / neu, Ki-67 - е диагностиката на всички налични рецептори, отговорни за активността на раковата тъкан. Включва изследване на множество показатели.
• PR, ER са специфични рецепторни протеини, които реагират на производството на естроген и прогестерон. Повечето видове рак на гърдата (около 80 процента) реагират активно на промените в нивата на хормоните. Определянето на реактивността на тези рецептори играе критична роля при оценката на потенциала на хормоналната терапия.
• HER-2 / neu е генна протеинова структура, разположена в раковата тъкан. Това е рецептор, който реагира на производството на специфични антитела. Препоръчително е да се проучи този параметър от гледна точка на определяне на прогнозата за лечение на рак. При висока HER-2 / neu активност туморът е труден за лечение; първо се изисква моноклонална терапия за потискане на активността на тази структура.
• Ki-67 е протеинова структура със способността да се активира по време на активен туморен растеж. Изследването на този показател дава възможност да се оцени прогнозата за живота на пациента. Колкото по-високи са експресивните характеристики на Ki-67, толкова по-малко е диференциацията на тумора, толкова по-малко шансове има болна жена за възстановяване.

Тумори на простатата

Ракът на простатата е един от най-често срещаните видове рак в света. Повечето случаи (50 - 70%) се диагностицират на 3-4 етапа, включително 25% - с генерализация на туморния процес. За съжаление ранната диагностика на рака е трудна поради честата липса на характерни симптоми. Наред с клиничните методи, най-информативен е методът за хистологично изследване на биопсии на простатната жлеза.

Основни диагностични маркери:

• р63;
• PSAP (ProstaticAcidPhosphatase);
• PSA (простатен специфичен антиген);
• P504s (= AMACR - Алфа метилацил-КоА-рацемаза);
• Цитокератин с високо молекулярно тегло (34betaE12);
• ERG (свързан с ETS ген);
• PSMA (специфичен за простатата мембранен антиген);
• Андрогенен рецептор;
• Bcl-X;
• Цитокератин 5 и 6;
• Цитокератин Пан;
• Кератин 8;
• Цитокератин 8 и 18;
• Ки-67;
• р53;
• Синаптофизин;
• Коктейл от базални клетки - цитокератин HMW + p63.

Белодробни тумори

Ракът на белия дроб е една от най-честите причини за смърт. Всяка година в света от тази болест умират около 1 милион души. При мъжете ракът на белия дроб в 85-90% от случаите е свързан с тютюнопушенето. Прогнозата за рак на белия дроб остава лоша. При липса на лечение до 90% от пациентите умират в рамките на 2 години от момента на поставяне на диагнозата. При хирургично лечение 5-годишната преживяемост е около 30%. Хирургичното лечение, съчетано с лъчева и медикаментозна терапия, увеличава 5-годишната преживяемост с 40%. Наличието на метастази значително влошава прогнозата. Съвременната диагностика и лечение на пациенти с рак на белия дроб не може без морфологична верификация на тумора с уточняване на хистологичната структура и степен на анаплазия (диференциация) на туморните клетки. Имунохистохимичният метод остава един от най-информативните методи на този етап от диагностиката.

Основни диагностични маркери:

• Тироиден транскрипционен фактор-1;
• Цитокератин 7;
• НЕМЪЛКИ РАК НА КЛЕТКИТЕ
  • ALK (DE5F3);
• РАК НА КЛЕТКИ КЛЕТКИ
  • Цитокератин 14;
  • Цитокератин 5/6;
  • CEA;
  • EGFR;
• МАЛЪК КЛЕЧЕН КАРЦИНОМ НА ДЪРВА
  • ХромогранинА;
  • Синаптофизин;
• АДЕНОКАРЦИНОМ НА БЕЗ ДЪРВА
  • EMA;
  • Цитокератин Пан.

Меланом

Меланомът (лат. Melanoma, melanoma malignum от древногръцки. Μέλας - „черен”) (уста. Melanoblastoma) е злокачествен тумор, който се развива от меланоцити - пигментни клетки, които произвеждат меланини. Един от трите вида рак на кожата и най-опасният от тях. Локализира се главно в кожата, по-рядко в ретината, лигавиците (устната кухина, влагалището, ректума). Един от най-опасните човешки злокачествени тумори, често повтарящи се и метастатични лимфогенни и хематогенни в почти всички органи. Проверката на меланома на кожата и нейните метастази остава една от най-трудните задачи за онкоморфолога. Сред непигментираните меланоми има нодуларни, повърхностно разпространяващи се, като лентиго, ясноклетъчни, вретеновидни, плеоморфни, дребноклетъчни, миксоидни, "невад", крикоидни и други форми.

Основни диагностични маркери:

• MelanomaAssociatedAntigen (MAA);
• CD63;
• Меланомен маркер (HMB45);
• MART-1 / Melan-A;
• Меланом (gp100);
• Тирозиназа;
• Фактор на транскрипция на микрофталмия (MiTF);
• Рецептор за фактор на растеж на нервите (NGFR);
• S100;
• Melanoma Pan (HMB45 + A103 + T311);
• MART-1 + тирозиназа;
• Виментин.

Стандартният панел съдържа около пет имунохистохимични маркера:

• p53 - степента на активност на митозата на меланома;
• Ki-67 - оценка на интензивността на пролиферацията, определя прогнозата на заболяването;
• bcl-2 - протеин, който предотвратява естествената апоптоза на кожния меланом, изчислява се вероятността от метастази;
• HMB-45 - оценка на меланоцитната функция;
• S-100 е типичен антиген, открит само при меланома и може да бъде разграничен от други тумори или доброкачествени образувания.

Лимфопролиферативни нарушения

Лимфомът е злокачествено туморно заболяване на лимфната система. Сред лимфомите се различава лимфогрануломатозата (ходжкинов лимфом) и всички останали видове лимфоми са неходжкинови лимфоми (NHL). Според вида на лимфоидните клетки, от които възниква тумор, се изолират В-, Т- и (рядко) NK-клетъчни лимфоми. Повечето лимфоми са В-клетки. Понастоящем диагностиката на лимфопролиферативни заболявания е в челните редици на съвременната патология и изисква един от най-обширните маркери. Общата честота на всички видове неходжкинови лимфоми в европейските страни е 12-15 случая на 100 хиляди население годишно. Рискът от появата им се увеличава с възрастта. Инфекцията с вируса на Epstein-Barr е свързана с повишен риск от развитие на различни видове лимфоми, включително лимфом на Burkitt. При деца неходжкиновите лимфоми са сравнително редки: не повече от 5% от всички случаи на NHL се дължат на детството и юношеството. Въпреки това, лимфомите заемат третото място в структурата на детските злокачествени заболявания по честота - след левкемия и тумори на централната нервна система..

Основни диагностични маркери:

Стромални тумори на стомашно-чревния тракт (SOGT)

Стомашно-чревният тракт се среща главно в стомаха (60%) и тънките черва (25%), но се среща и в ректума (5%), хранопровода (5%) и редица други места (5%), включително апендикса, жлъчния мехур, мезентериум и салник. Възрастта на засегнатите пациенти варира от юношеска възраст до 90 години, но повечето пациенти са по-възрастни с връх около 60 години. В повечето изследвания има леко предразположение към мъжете. През 1998 г. беше показано, че OGHT експресира тирозин киназния рецептор KIT (CD117). Интерстициалните клетки на Cajal (ICC) са причина за тези тумори. Подобно на GST, клетките на Cajal експресират KIT и повечето са положителни за CD34. Последвалите проучвания с голям брой различни лаборатории потвърдиха, че KIT е най-специфичният маркер на SOS. Имунно откриваем KIT присъства на клетъчната повърхност и / или в цитоплазмата на туморни клетки в стомашно-чревния тракт в приблизително 90% от случаите. В по-голямата част от туморите експресията на KIT е силна и хомогенна, но в някои случаи се демонстрира само фокална положителна реактивност и KIT отсъства в малка подгрупа (

5%) от тумори, които съответстват на стомашно-чревния тракт според други морфологични и имунофенотипни характеристики. Сред KIT-положителните SALFA, експресията на CD34 се определя в 60-70% от случаите, докато 30-40% имат положителна реакция към актина на гладката мускулатура (SMA) и 5% - към протеина S-100. Нито един от тези антигени не е специфичен за стомашно-чревния тракт. Експресията на десмин в истински KIT-позитивен SAT е изключително рядка (1-2% от случаите) и обикновено фокусна. Тази форма на онкологични заболявания е трудна за диагностициране морфологично. Използвайки съвременни маркери, е възможно ясно и разумно да се диагностицират различни форми на описаната патология. Имунохистохимията е задължителна.

Основни диагностични маркери:

• CD117 c-комплект;
• CD34;
• Десмин;
• Бета-Катенин;
• S100;
• GFAP;
• CD99;
• ActinSmoothMuscle.

Колоректален рак

Колоректалният рак е третият най-често диагностициран рак в САЩ (с изключение на рака на кожата) при мъжкото и женското население. Честотата на случаите на колоректален рак намалява през последните две десетилетия (от 66,3 случая на 100 000 през 1985 г. на 45,5 случая през 2006 г.). Това се дължи на увеличеното използване на колоректални скринингови тестове, които позволяват откриването и отстраняването на стомашно-чревни полипи, преди те да се развият в рак. За разлика от общия спад, сред младото възрастно население под 50 години, за което не се препоръчва скрининг поради умерения риск, честотата на рак на дебелото черво и ректума се е увеличила от 1994 г. с около 2% годишно при мъжете и жените. През 2016 г. смъртността в САЩ от колоректален рак е 49 500. Смъртността от колоректален рак е намаляла и при двете групи мъже и жени през последните няколко десетилетия, като в последно време по-рязко спада. Този спад отразява спад в нивата на заболеваемост и подобрена ранна диагностика и лечение. Ранните стадии на рак на дебелото черво и ректума обикновено са асимптоматични, така че често е необходим скрининг за откриване на болестта в този ранен стадий. Прогресията на заболяването може да причини кървене от ректума, поява на кръв в изпражненията, промяна в движението на червата, спазми в долната част на корема. Използването на IHC при рак на дебелото черво се разглежда на няколко нива: за характеризиране на тумори (ендокринен или епителен тип), наследствено предразположение и за целите на прогнозата. Преобладаващата употреба на IHC е да се идентифицират възможни или предполагаеми метастази, при които дебелото черво е възможно първично. Типични места за метастази в дебелото черво са черният дроб и белите дробове, и двата органа, които могат да произведат морфология на рака, идентична с метастазите в дебелото черво. IHC, (клас I FDA регулация), се използва след първоначална диагноза на тумора чрез хистопатологично изследване и не е включен за клиницистите като независимо проучване.

Основни диагностични маркери:

• Бета-Катенин;
• BRAF;
• CDX-2;
• COX-2;
• Цитокератин 7;
• Цитокератин 19;
• Цитокератин 20;
• MLH1;
• MLH2;
• MLH6;
• MSLN;
• MUC1;
• MUC2.

Метастатичен карцином

Най-честото използване на имунохистохимия при изследване на чернодробни тумори е определянето на източника на метастази, когато не е известна основната локализация на тумора. Разработването и приложението на панел за имунооцветяване може да помогне за решаването на почти всички диагностични проблеми. 2-6 Цитокератини (CK) 7 и CK 20 - първата стъпка в идентифицирането на много тумори и с допълнителни имунни реакции, относително специфични за тумори на женския и мъжкия генитален тракт, често дава възможност да се идентифицира първичната локализация на метастатичен тумор.

Основни диагностични маркери:

• Цитокератини с различно молекулно тегло (CK 18, CK 19, CK 7 и CK 20 и др.).

Също така се препоръчва да се включат IHC тестове, насочени към експресията на HER2 / neu и Ki-67 в диагностичния панел..

• HER2 / neu е мембранен протеин, кодиран от гена ERBB2. Повишаването на неговата експресия е важно в патогенезата и прогресирането на някои злокачествени процеси. Тестването на този рецептор е важен биологичен маркер за рак на стомаха, гърдата, матката и нейните придатъци.
• Ki-67 е ядрен антиген, състоящ се от две полипептидни вериги и е основната част от ядрената матрица. Експресията му дава възможност да се изолират пролифериращи туморни клетки, които са в активната фаза на жизнения цикъл на клетката. Този маркер ви позволява да определите фенотипа и скоростта на туморен растеж, риска от метастази, потенциалния отговор на терапевтичните мерки и резултата от патологичния процес.

Тумори на стомаха.

Имунохистохимичните изследвания (IHC) обикновено не са необходими за оценка на доброкачествени и злокачествени тумори на стомашния епител, тъй като хистопатологията обикновено дава диагноза, но IHC е необходима при изследване на метастатичен рак на стомаха, когато произходът на тумора не е ясен или когато е макроскопичен / Рентгеновите прояви на тумора са объркващи (например ракът на стомаха директно и широко нахлува в черния дроб и хистологично не се различава от холангиокарцинома). В допълнение, IHC може да бъде полезен за идентифициране на няколко варианта на стомашни карциноми, включително хепатоиден аденокарцином, при които чернодробната диференциация може да бъде потвърдена чрез положителен AFP отговор. Стомашните аденокарциноми ще реагират с много антикератинови антитела, включително CK 18, CK 19, CK 7 и CK 20. Когато CK 7 и CK 20 се използват заедно, много стомашни аденокарциноми ще оцветят както CK 7, така и CK 20. Приблизително 25% случаите ще имат фенотип CK 7 + / CK 20- или CK 7- / CK 20+), а малък брой случаи ще бъдат отрицателни и за двата маркера. Първоначално се смяташе, че CDX-2, специфичен маркер за рак на дебелото черво, ще бъде реактивен в повече от 50% от случаите и може да показва по-малко инвазивност. Аденокарциномът на стомаха, както чревният, така и пръстеновидно-клетъчният карцином, може да има невроендокринна диференциация и което може да не е очевидно от хистологичната картина, но се проявява чрез оцветяване с хромогранин и / или синаптофизин

Определяне на експресията на EGFR рецептор в епителни тумори

Имунохистохимичното (IHC) определяне на експресията на EGFR рецептор при колоректален рак и тумори на белия дроб, както и при тумори на шията и главата, се извършва за адекватен избор на схеми на химиотерапевтично лечение.

EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor) е един от трансмембранните рецептори, експресиран на повърхността на епителните клетки и участва в регулирането на клетъчния растеж и диференциация. Клетъчното делене в негово присъствие се случва много по-бързо. Когато EGFR рецепторът се активира след свързване с растежни фактори (EGF и TGF-a), се задействат механизмите, които водят до туморен растеж и се увеличава пролиферацията на раковите клетки, а също така се стимулира процесът на метастазиране. активност на рецептора за епидермален растежен фактор. Тъй като активирането на рецептора става поради веществата на самата неоплазма, би било по-правилно да се говори за експресията на EGFR от тумора.Експресията на EGFR се открива при следните форми на рак: белия дроб, шията и главата, дебелото черво и ректума. Имунохистохимичното определяне на експресията на EGFR дава възможност да се установи състоянието на тези рецептори и да се предпише лечение. Експресията на EGFR е пряко свързана със степента на злокачественост и етапа на развитие на тумора.Специалистът, в съответствие с получените данни от имунохистохимичното проучване, класифицира тумора като EGFR-отрицателен или EGFR-положителен.

Свръхекспресията на EGFR показва висока злокачественост, късно развитие на тумора и метастатични процеси. Този фактор е неблагоприятен по отношение на прогнозата на заболяването и показва висока пролиферативна активност на тумора, агресивност, резистентност към терапията..

Ниската степен на експресия на EGFR показва регресия на тумора с положителна динамика в лечението.

Имунохистохимично изследване на рецепторната чувствителност към естроген и прогестерон в ендометриума

Имунохистохимично изследване на рецепторна чувствителност към естроген и прогестерон в ендометриума се извършва, за да се идентифицират причините за липсата на плодовитост, както и за оценка на злокачествеността на процесите в тъканите на матката. Изследването е сложно, извършва се планомерно, изисква се подходяща квалификация на патолог.

Рецепторите за естроген (ER) и прогестерон (PR) са чувствителни маркери, които реагират на колебания в определени хормони, които влияят на туморния растеж и развитието на хиперпластични процеси в ендометриума. Те се намират както в тъканите на епитела на матката, така и в клетките на млечната жлеза. Тяхното определяне дава възможност да се оцени влиянието на хормоналните фактори върху прогресията на злокачествения растеж и освен това да се идентифицира наличието на други огнища на активност, освен маточната. Включени са в задължителната скринингова програма за болни жени със съмнение за инфилтративна ракова активност.

Имунохистохимичното изследване се извършва с:

• безплодие;
• ендометриални тумори;
• дисфункция на менструацията;
• хиперпластични процеси в ендометриума.

В случай на безплодие техниката ще ви позволи да разберете дали оплодената яйцеклетка може да се прикрепи към стената на матката. При рак методът не е ранна диагноза. Оценката на рецепторната активност позволява да се идентифицира наличието на метастази и да се оцени ефективността на лечението в маточната кухина. В случай на нарушения на овулацията, методът установява ефективността на хормоналната терапия. С промени в маточната кухина от хиперпластичен характер, увеличаването на активността на рецепторите за естроген и прогестерон показва развитието на слабо диференцирани тумори, потенциално опасни за живота на жената.

Общият принцип на резултата е, че колкото по-голяма е експресията на рецепторната активност, толкова по-голяма е вероятността за прогресия на тумора. Колкото по-ниска е активността, толкова по-малка е възможността за естествено торене.

Хроничен ендометрит

Хроничният ендометрит е възпаление на лигавичния слой на матката, което се провокира от различни вируси или патогенни микроорганизми. В патологичния фокус настъпват морфологични и функционални промени на ендометриума.Хроничният ендометрит е клиничен и морфологичен синдром, при който в резултат на увреждане на ендометриума от инфекциозен агент настъпват множество вторични морфологични и функционални промени, които нарушават цикличната биотрансформация на маточната лигавица, което води до трайно нарушаване на менструалните и генеративните функции. честотата на хроничния ендометрит сред населението е 2,6-51%. Нещо повече, сред тези жени 60,4% са безплодни, а неуспешни опити за IVF и ембриотрансфер са отбелязани при 37%. През 2006 г. Международната федерация по гинекология и акушерство приравнява понятията "неразвита бременност" и "хроничен ендометрит".

Причините за хроничен ендометрит:

• инфекции на тазовите органи, вагината и цервикалния канал;
• вътрематочно устройство;
• ранни интимни контакти;
• лъчетерапия на тазовите органи;
• хирургическа интервенция в маточната кухина;
• злоупотреба с алкохол и тютюнопушене.

Практикуващите експерти наричат ​​възпалителните процеси, протичащи в тазовите органи, като автоимунна патология. За да се определи естеството на нарушенията и да се идентифицират пациенти с патологичен отговор на имунната система, провокиращ възпаление на ендометриума, се предписва имунохистохимично проучване, което се извършва с помощта на стандартен панел от моноклонални антитела: CD16, CD20, CD138, CD56, HLA-DR.

Имунохистохимично изследване на възприемчивостта на ендометриума (имплантационен прозорец)

Възприемчивостта на ендометриума е комплекс от структурни и функционални характеристики на ендометриума, който определя способността му за имплантиране. От началото на 90-те години на миналия век понятието "възприемчивост на ендометриума" започва да придобива съвременното си значение като процес на сложна интеграция и многостепенен "диалог" между ендометриума и ембриона в определен период от "имплантационния прозорец". Продължителността на "имплантационния прозорец" при хората е средно 4 дни: от 6-ия до 8-10-ия ден след пика на секрецията на LH, или 20-24 дни от менструалния цикъл (с 28-дневен менструален цикъл). В момента има три нива на възприемчивост: генетично, протеомично и хистологично. Когато се отвори "прозорецът на имплантацията" в ендометриума, експресията на 395 гена (ApoE, PLA2) се увеличава и експресията на 186 гена (ITF, различни протеази, протеини на извънклетъчната матрица и др.) Намалява. Сред протеомните маркери, свързани с възприемчивостта на ендометриума, се различават различни адхезионни молекули, растежни фактори, цитокини и рецептори: семейство IL-1, LIF и LIF-R, αVβ3, TNF-α, IFN-γ и др. От тях левкемията е най-изследвана -инхибиращ фактор (LIF) е член на семейството IL-6. Максималната му експресия в ендометриума се наблюдава на 20-ия ден от цикъла.Третото ниво на възприемчивост е хистологично. „Прозорецът на имплантация" в ендометриума съответства на средния етап на фазата на секреция на менструалния цикъл. Ендометриумът може да има рецептивни свойства само ако молекулярните маркери на възприемчивостта се открият точно в средния етап на фазата на секреция на менструалния цикъл. Едни от ключовите ултраструктурни образувания, участващи във формирането на възприемчивост са пиноподия. Това са микроскопични издатини в апикалната част на повърхностния епител на ендометриума, образувани на мястото на микровили в „имплантационния прозорец“ и изпъкнали в маточната кухина. Предполага се, че основните рецептори за прикрепване на бластоцити са разположени на повърхността на пиноподията, където също е концентриран LIF.Всеки дисбаланс в експресията на стероидни рецептори може да доведе до нарушаване на морфофункционалните свойства на ендометриума, неговата възприемчивост. Следователно, определянето на нивата на ER и PR в средния етап на фазата на секреция дава възможност да се допълни морфологичното изследване на ендометриума, за да се оцени неговата възприемчивост. Обикновено съотношението PR / ER в стромата варира от 2 до 4. В средния етап на фазата на секреция се наблюдава физиологично намаляване на нивото на ERα в ендометриума. Това е критично събитие, което освобождава определени гени от непреодолимото влияние и дава сигнал за настъпване на вътрематочна възприемчивост..

Свръхекспресията на ER α в средния етап на фазата на секреция причинява нарушена експресия на биологични маркери на имплантацията, уврежда възприемчивостта на ендометриума.

Комплексната програма за изследване се състои от следния панел от антитела: ER, PgR, CD56, CD138, LIF, както и броене на броя на пиноподиите.

Цена за тестове

Ендоскопски материал

* (брой работни дни, с изключение на деня на доставка на материала)

Как да направите изследването?

Материал за изследване: хирургичен и биопсичен материал, както и готови парафинови блокове с очила (туморна проба). Препоръчително е да се предостави извлечение от медицинската история, резултатите от КТ, ЯМР и предишния хистологичен доклад (ако диагнозата на тумора не е основна).

Прием на материал: в работното време на медицинския център.

Подготовка за изследване: не се изисква.